一、准备工作

1、检查蒸汽发生器，确保已开启;

2、检查空气源，保证供气压力在0.4~0.7MPa之间，相对湿度应小于60%;再调节空气减压阀，使其出口压力在0.2~0.25MPa之间;

3、检查各管道、阀门是否有泄漏，进料口、补料口硅胶垫是否需要更换，如有请及时修整;

4、检查各压力表是否归零，不能归零的予以更换;
5、检查罐内是否清洗干净，
6、查看控制系统、传动系统是否良好，
7、检查完毕进行打压试漏:压力0.15MPa保持30min，如果出现压力下降，请用肥皂水查找泄漏点，并进行修复;

8、安装已标定的PH电极、溶氧电极等其他检测设备，确保已安装到位、螺母旋紧;
9、检查一切无问题，如实填写记录并签字


二、空气过滤器消毒

1、首先关闭空气过滤器前的进蒸汽阀，缓慢卸掉空气过滤器内压力，
2、打开蒸汽过滤器下端的排污阀( 排净冷凝水后微开)，缓缓开启蒸汽阀，排净管道内冷疑水后调整蒸汽阀大小，保证蒸汽压力0.2MPa以上;

3、打开空气过滤器下端的排污阀，慢慢打开过滤器前的蒸汽阀，待排尽冷凝水后排污阀微开;

4、开启过滤器后的排气阀门，通过凋整其与蒸汽阀的大小，维持压力0.12~0.14MPa 消毒30min;

5、消毒結束凋小排气阀与排污阀的开度，迅速关闭蒸汽阀同时打开进空气阀(换气过程中保证压力不掉零)，调整空气阀大小保持压力在0.08~0.1MPa，以便吹干空气过滤器;

6、约20-30min过滤器吹干后(过滤器外壁温度降至常温，手武吹出的空气干燥、細膩、滑洞)，关闭过滤器下端的排阀閥及排气阀，保持正压;
三、罐空消
1、首先打开夹套下端的排水閥，排尽央套中的水;

2、依次打幵取祥阀、蒸汽阀，排尽管道内冷凝水后将取祥阀转为微幵;稍幵罐排气阀，再緩慢幵后罐底隔膜阀使蒸汽徐徐进入发酵罐;
3、在灭菌过程中吋刻注意并控制罐压在0.11~0.12MPa内，罐压的控制通过蒸汽阀和排气阀来实现;

4、空消30-50min后，关闭蒸汽阀和罐底隔膜阀，关闭后压力会迅速下降，为防止罐内产生负压，需将进空气阀打幵，维持罐压0.03~0.05MPa或者压力下降至零吋将排气阀打幵自然冷却;待温度降至80度以下吋排尽罐内冷凝水;
四、实消
1、将标定好的PH电极、溶氧电极等检测设备安装，检査确保安装到位，旋紧螺母;
2、关闭罐底隔膜阀，微通风、开低转速，按工艺要求将配制好的培养基加入罐内，检査无漏加原料后将加料口螺母适度拧紧;
3、打开夹套排水阀，排尽夹层水，关闭夹套进出水阀门，缓慢打开夹套进蒸汽阀(打开过快夹层容易产生异响)进行预热，保证夹层压力小于0. 1MPa;
4、待罐内温度达到90度以上(某些培养基在70-90度时容易起泡沫，注意观察)时关闭夹套蒸汽阀;
5、关闭搅拌、通风，排气阀微开;依次打开取样阀、蒸汽阀，排尽管道内冷凝水后将取样阀转为微开，打开罐底隔膜阀，将蒸汽缓缓通入罐内(注意料液翻滚);再打开进风管道上的蒸汽阀门，通过控制罐底隔膜阀、风管蒸汽阀、排气阀调节罐压至0.11~0.12MPa，维持121C灭菌30min (加料口、补料口等均稍微排气，以彻底消除死角，时刻注意罐压);

6、灭菌过程中校正溶氧电极零点，30min 灭菌完毕后，依次关闭加料口、补料口、罐底隔膜阀、风管蒸汽阀，关闭夹套排水阀，打开循环进出水阀(变换要迅速，时刻注意罐压变化，防掉零);此时在控制柜中找到对应罐，开启冷却手动和转速按键，开始泠却降温;

7、降温时罐压将迅速下降,当降至0.05MPa时开启风管进气阀，随时保持压力在0.05MPa;


五、无菌接种
1、当料液温度降至工艺要求时，按照工艺要求将转速、通风量调至最大，并维持罐压稳定几分钟后，标定溶氧电极满度;
2、用酒精棉擦拭接种口和接种者双手，火圈加入酒精套在接种口上，关闭搅拌转速，降低通风量，维持罐压在0. 01^0.02MPa (不能掉零，否则容易引起污染)，点燃火圈，用工具扳手缓慢拧下接种口螺母(快速开启，容易出现危险)，螺母不能离开火焰，
3、接种者将菌种瓶口在火焰上稍微烧一会儿，拔下瓶塞迅速将菌种倒入罐内;
4、拧紧接种口螺母，熄灭火焰，并用酒精棉将接种口擦拭干净;按工艺要求调好转速、通风量、罐压，并点击“开始发酵”按键开始计时培养;

六、取样操作
关闭蒸汽阀、全开取样阀，开启罐底隔膜阀进行取样;取样完毕后微开取样阀和蒸汽阀，用少量蒸汽进行封口，保持无菌状态。

七、罐的清洗
1、发酵罐在使用前和使用后要及时清洗干净，打开两边清洗口，用水管清洗余料，若不能清洗干净则需拆开罐盖;

2、拆洗前首先关闭电源，拧开周边螺丝，两人小心地同时将罐盖垂直向上取出(注意:请不要抓传动轴，以免影响机械密封和轴的传动稳定性)，水平放置平整的地面上，并防止滚动;
3、彻底清洗干净后，将罐盖按原位轻轻放入发酵罐内，拧上周边螺丝(注意:对角拧螺丝，松紧基本一致);

4、安装完毕后通入空气(O. 15MPa) ，检查管道和罐的密封性，如有泄漏则需修复;

5、如不接着进入下一批发酵，请将溶氧电极拆下清洗干净，放回安全处保存，PH电极清洗干净浸泡在3mol/L的KCL溶液中保存
八、维护与保养

1、与发酵相配套设备按要求定期维护与保养，

2、空气精过滤滤芯根据实际使用效果定期更换，一般使用期限为一年，

3、发酵罐清洗时，请使用软毛刷，避免硬器刮擦，

4、压力表、减压阀时常检查，不归零及时更换;
5、定期检查垫圈、密封圈等，损坏及时更换，以免影响罐的密封性;
6、电器、仪表、传感器等电器设备严禁直接接触水、汽，

7、PH电极在使用前必须通电稳定2-3h，否则电极不稳定，造成测量数据不准，
8、溶氧电极在使用前必须通极化4-6h，否则电极不稳定，造成测量数据会不准;

9、设备长时间停止使用时，应清洗干净，排尽罐内及各管道中的余水，松开罐盖螺丝，防止密封圈产生永久变形。